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    红细胞溶血试验(RBC)

 

RBC是一种动物眼刺激试验的替代方法。通过测定血红蛋白漏出量及变性程度,确定受试物引起红细胞50%发生溶血时的受试物浓度(LC50值)和血红蛋白变性指数(DI,%)计算L/D值(LC50/DI),以L/D值作为评价标准,进行眼刺激性分级,来评价化学品对眼组织细胞的损伤。

   美白祛斑效果评价

 

1  酪氨酸酶活性抑制性能:IC50(酪氨酸酶)——抑制酪氨酸酶50%活性需要的浓度。 

2   黑色素B16细胞活性抑制:IC50(黑色素B16)——抑制黑色素50%活性需要的浓度。

因为酪氨酸酶在黑色素形成最重要的两步都起关键作用,而皮肤的色泽和斑点取决于黑色素的分布。IC为抑制浓度(inhibition concentration)的英文缩写,两种IC50互补,IC50(酪氨酸酶)作为原料初步筛选,IC50(黑色素B16)的评价更接近临床评价。

 A 数值越小,性能越优秀。 

B  两种IC50但都未考虑原料渗透吸收性能。

C  性能良好的美白原料,这两个数值都很小,同时原料具备良好的脂溶性和合理的分子量。

           基因表达测试

基因表达(gene expression)是指细胞在生命过程中,把储存在DNA顺序中的遗传信息经过转录和翻译,转变成具有生物活性的蛋白质分子。基因表达与细胞培养技术不分家,是化妆品原料的安全性、功效性(美白、抗衰老、祛斑、抗过敏等)的重要评价手段。

实验步骤:复苏细胞,传代2~3次,等细胞活性稳定后,根据实验目的对细胞进行特殊处理(如抗炎用LPS刺激等),用不同浓度的受试物进行工孵育,测定细胞目的基因的表达情况。基因表达测定常用方法有:RT-PCR,逆转录聚合酶链式反应,提取细胞RNA,反转录,PCR扩增,测定含量;‚ELISA,酶联免疫吸附测定,直接测定蛋白表达量。


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